Trichoderma 생물 반응기

위에서 언급한 바와 같이, 곰팡이 그루는 섬유소 효소, 소수단백질 등을 생산하는 데 사용될 수 있는데, 그 살아있는 세포는 마치 현대공업발효 생산 라인에서 없어서는 안 될' 생물기계' 인 것 같으며, 생물반응기로 이원단백질 (Adrioet Al., 23) 을 생산할 수 있다. < P > Trichoderma 를 포함한 실크 곰팡이 표현 시스템은 최근 몇 년 동안 새롭게 부상한 외원 유전자 표현에 사용되는 시스템으로 원핵 표현 시스템에서 특정 번역 후 손질할 수 없는 결함을 극복하고 양조효모보다 외원 단백질을 분비할 수 있는 능력이 높기 때문에 생물학적 활성을 가진 진핵 생물 단백질을 생산하는 중요한 시스템이 되었다. 우리는 유전자 복제 수를 늘리거나 효소 분자의 구조를 개조하여 돌연변이 효율을 높일 수 있으며, 높은 생산량을 얻을 수 있는 공업균그루를 얻을 수 있다. < P > 곰팡이의 변환 시스템은 다른 곰팡이 변환 시스템과 유사하며, 세균 공급원을 사용하는 입자로 구성된 전달체가 많아 폴리에틸렌 글리콜 (PEG), 소르비톨, 염화칼슘의 작용으로 목적의 유전자나 DNA 조각을 수용체 원형질체에 도입하여 재생과 선택을 거쳐 전환자를 얻는다. 1998 년, De Groot 등은 처음으로 ATMT 법을 이용하여 T.reesei 를 포함한 6 가지 실크 균류를 변환하여 성공을 거두었다. < P > 최초로 생물반응기로 이원단백질을 생산한 곰팡이는 T.reese 로, 2 년 전 송아지 응고효소 (US Italoet al., 1991) 를 표현한 뒤 면역활성 항체 조각 (Nyssonenet al., 1993) 을 표현하는 데 사용되었다.

T.reesei 는 섬유소 효소, 반섬유소 효소의 주요 산업 생산 균주로, 독성이 없고 무해하며 강력한 단백질 분비 능력을 갖추고 있으며, 일부 돌연변이의 외분비단백질 양은 1g/L 에 달할 수 있으며, 고등 포유동물과 비슷한 당화 시스템을 갖추고 있어 매우 이상적인 재조합 단백질 표현 숙주, 국제적으로 유명한 효소 제제 회사다

T.reesei 에서 섬유 이당수 분해효소 CBH1 은 외분비 단백질의 64 ~ 8% 를 차지하는 단일 복사 유전자로 코딩되므로 CBH1 의 시동자는 보통 강력한 시동기로 이원 단백질을 표현하는 데 사용된다. Joutsjoki 는 1993 년 Hormoconis resinae 포도당 디아스타제 P 를 함유한 유전자 (gamP) 와 그에 상응하는 cDNA 를 함유한 cbh1 프로모터의 통제 하에 T.reesei 의 cbh1 프로모터 제어 하에 발현된 두 가지 전달체를 구축했다. 이 두 가지 전달체에서 cbh1 시동자는 gamP 단백질 코드 영역 상류에 정확하게 연결되어 T.reesei 가 활기찬 포도당 디아스타제 P(GAMP) 를 분비하도록 지도한다. 연구결과에 따르면 gamP cD-NA 를 함유한 최적의 전환체능 분비는 약 7mg/L 의 활기찬 감마가 H.resinae 의 생산량의 2 배에 달하는 것으로 나타났다. < P > 동신예 등 (212) 은 cbh1 강발자를 이용해 현피버섯 (P.ostreatus) 에서 나온 라크제 유전자를 성공적으로 표현했다. 그 결과 흔들병 발효를 통해 얻은 조효소액의 효소가 237.134IU/mL 로 현재 국내외 문헌에서 가장 높은 것으로 나타났다. 곰팡이가 흑곰팡이 (Aspergillus Niger), 아스페르글루스 (Aspergillus nidulans), 쌀곰팡이 (Aspergillus oryzae) 에서 이종 표현의 최고 표현량보다 훨씬 높다. < P > 왕천홍 등 (23) 은 PCR 기술을 사용하여 T.reesei 의 cbh1 의 시동자 및 종료 하위 시퀀스를 얻었고, 대장균 플라스미드 pUC19 를 뼈대로 사용하여 이 시동자와 종료 하위 시퀀스 사이에 다중 복제 지점을 추가하고, T.reesei 강한 표현 통합 전달체 pTRIL 을 구축했습니다. 이를 바탕으로 T.reesei 표현 시스템을 새로운 진핵 생물 표현 시스템으로 발전시켜 인간을 대량으로 표현하는 데 필요한 각종 단백질을 대량으로 표현하여 진핵 유전자 산물 생산을 위한 또 다른 대안을 제공할 수 있을 것으로 기대된다. (윌리엄 셰익스피어, Northern Exposure (미국 TV 드라마), Northern Exposure (미국 TV 드라마) < P > 사상 균류를 숙주 균으로 이용하여 재조합 단백질을 생산할 때 숙주 주요 단백질 생산량을 줄이면 대외원 단백질의 분해를 줄이고 결국 외원 목적 단백질의 수율을 높일 수 있다. 연습은 전통적인 돌연변이 유발 방법 또는 유전자 녹아웃 방법으로 주요 프로테아제 유전자를 비활성화시키는 것이 재조합 단백질 분해를 피하는 주요 수단임을 보여줍니다. Mattern 등 (1992) 은 얻어진 Apergillus Niger 프로테아제 결실 돌연변이를 숙주 표현으로 포외 이원 프로테아제를 표현하여 돌연변이주 외원단백질 분비량을 크게 높였다. 왕천홍 등 (24) 포도당에 의해 저지되는 섬유소 효소 생산균주 T.reesei Rut C3 은 화학적 유인을 통해 단백질 부분 결함 돌연변이인 T.reesei Rut C3M3 을 얻었고, 돌연변이 균주 Rut C3M3 의 세포 외 프로테아제 활성은 친본주보다 약 74% 감소했지만 성장 특성, 섬유소 효소 활성성 < P > 결어 < P > Trichoderma spp.) 는 생산 잠재력이 큰 곰팡이로, 곰팡이속 곰팡이의 생분해 및 생물 전환 기능은 섬유소 효소, 글루칸효소, 키틴효소, 지방효소, 목당효소 등의 효소를 분비하는 능력과 관련이 있다. T.harzianum, T.aureoviride, T.T.viride, T.koningi, T.longibrachiatum, T. ve 와 같은 다양한 Trichoderma 를 알고 있습니다 또 곰팡이가 혐기성 조건 하에서 셀룰로오스나 설탕을 알코올로 직접 발효시킬 수 있다는 연구결과가 나왔다. 그 균사에는 대량의 기름 알갱이가 함유되어 있어 바이오에너지 방면에 막대한 응용 전망을 보이고 있다. Trichoderma 는 나노 미터 금속 입자를 생산하는 데 사용할 수 있습니다. 곰팡이가 단백질을 분비하는 능력이 강하여 좋은 이원단백질 생물반응기 등이다. 결론적으로, 곰팡이는 공업생물제조와 밀접한 연관이 있어 중요한 공업생물의 종류 중 하나이다. < P > 현재, 나무 곰팡이의 가장 널리 사용되는 응용은 생물방지이며, 대량의 실험은 토전균에 좋은 억제균 효과가 있다는 것을 증명하고, 이미 생물제제를 만들어 시장에 내놓았다. Trichoderma 는 인간의 병원체, Hjortkjaer 등 (1986) 이 쥐, 기니피그, 토끼를 이용한 T.reesei 치병성 연구에 따르면 T.reesei 는 치병성 없는 것으로 나타났다. Nevalainen 등 (1994) 은 T.reesei 가 안전한 효소 생산 균주일 뿐만 아니라 이원단백질로 숙주 균을 표현하는 것도 안전하다는 것을 보여준다. 하윤새 등 (212) 누에를 연구 대상으로 T.viride 를 생방균의 독성으로 연구한 결과 곰팡이 T23 이 누에의 성장과 발육, 생명력, 고치질 등에 큰 영향을 미치지 않는 것으로 나타났다. 위의 안전 실험은 실제 생산에서 곰팡이의 응용을 위한 기초를 다졌다. < P > 과학자들이 곰팡이 게놈 데이터에 대한 분석을 통해 각종 외비단백질 등 합성 과정과 관련된 유전자와 그 조절 요인의 조절 패턴을 탐구함에 따라, 반드시 곰팡이가 생물 제조 분야에서 더욱 광범위하게 응용되도록 추진할 것이다.