약물 내성 시험 소개

카탈로그 1 개요 2 약민 실험의 분류 2. 1 종이 확산법 2.2 희석법 2.2. 1 진지희석법 2.2.2 육수 희석법 2.3 항생제 농도 증도법 2.4 자동화 기기 3 실험 단계 3.654 . 2 세균 3. 1.3 계기공법 3.4 결과 3.5 표준 3.6 이 약민 결과에 영향을 미치는 요인 3.6. 1 배양기 3.6.2 세균 접종량 3.6.3 약물 농도 3.6.4 배양 읽기 쉽도록 아래의 약민 실험은 이미 내약 실험으로 자동 교체되었다. 여기를 클릭하여 원래 모습을 복원하거나 1 의 내성 테스트를 주석으로 표시할 수 있습니다. 병원 미생물의 각종 항생제에 대한 민감성 (또는 내성) 을 이해하고 임상 미생물학 실험에 항생제 약물을 합리적으로 선택하도록 지도하는 것이 목적이다. 항생제가 소량으로 병원균을 억제하고 죽일 수 있다면, 이 항생제는' 민감한' 항생제라고 불린다. 그렇지 않으면 "민감하지 않음" 또는 "내약" 이라고 합니다. 병원균이 어떤 항생제에 민감하고, 합리적으로 약을 복용하고, 맹목성을 줄이려면 약민 실험을 자주 해야 한다. 일반적인 방법은 다음과 같습니다. 환자의 감염 부위에서 병원균을 함유한 표본을 채취하여 적절한 배양기에 접종하여 일정한 조건 하에서 배양합니다. 동시에 배양기 표면에 일정량의 항생제가 묻은 종이 한 장 (또는 스테인리스강 고리로 일정량의 항생제 용액을 넣는 것) 을 붙여 일정 기간 배양한 후 결과를 관찰한다. 각종 항생제에 대한 병원균의 민감성이 다르기 때문에 약지 주위에 크기가 다른' 빈 원' 이 있어 병원균의 성장을 억제하는 것을 억제균권이라고 한다. 억제균의 크기는 병원균이 각종 항생제에 대한 민감성에 비례한다. 그래서 우리는 검사 결과에 따라 항생제를 선택할 수 있다. 최근 몇 년 동안 자동 약민 테스트 기구가 도입되어 테스트가 더욱 빠르고 정확해졌다. 현재 항생제 남용으로 내약균이 늘고 있고, 심지어 광보 항생제를 장기간 사용하여 체내의 정상적인 미생물을 죽이고 미생물의 상호 억제 작용을 상실하여 대량의 희귀하거나 일반 비병균이 번식하여 이른바' 2 차 감염' 이 빈번하게 발생하며, 인위적으로 치료난을 초래하고 있다. 따라서 약민 실험을 제창하고 합리적 약물 사용을 견지하는 것이 중요하다.

2 약민 실험 분류 2. 1 종이 확산법 이 방법은 접종 실험균의 진지 표면에 정량 항균제가 들어 있는 필터지 한 장을 붙이고, 종이 안의 약품은 진지내에서 확산되는 것이다. 확산 거리가 늘어남에 따라 항균제의 농도가 대수적으로 낮아져 용지 주위에 농도 구배가 형성된다. 동시에, 종이 주변의 억제균 농도 범위 내의 균주는 성장할 수 없고, 제 2 의 억제균 범위 밖의 균주는 성장할 수 있어 종이 주위에 투명한 억제균권을 형성할 수 있다. 세균약품에 따라 세균권 직경은 한천에서의 약물 확산 속도에 따라 다를 수 있다. 억제균의 크기는 실험균의 약물에 대한 민감성을 반영할 수 있으며, 약물이 실험균에 대한 MIC 와 부정적 관계를 맺고 있다.

2.2 희석법 약민 실험은 항균제의 어떤 세균에 대한 체외 활성화를 정량적으로 검출하는 데 사용할 수 있으며 한천 희석법과 육수 희석법으로 나뉜다. 실험에서 항균제의 농도는 보통 배수비 (lg2) 로 희석되어 테스트중인 세균의 성장을 억제하는 최소 약물 농도는 최소 억제균 농도 (MIC) 이다. 특정 항균제의 검출 농도 범위에는 세균을 감지할 수 있는 해석 전환점 (민감성, 중간성, 내약성) 의 농도와 품질관리용 참고균의 MIC 가 포함되어야 한다.

2.2. 1 한천 희석법은 먼저 항균제를 함유한 한천 희석판을 준비한다. 테스트 대상 균주를 접종한 다음 결과를 해석하다.

2.2.2 육수 희석법 2.3 항생제 농도 증도법 2.4 자동화 기기법 3 실험 단계 3. 1 실험재료: 일반 영양 한천 배양기는 생화학 시약 상점에서 구입할 수 있고, 세균에 따라 약민 실험은 다른 배양기를 선택할 수 있다. 예를 들면 대장균 약민 실험용 일반 영양 한천 또는 맥푸카이 배양기. 살모넬라균은 혈청 배양기를 선택할 수 있다.

3. 1. 1 약민 시험지 구매 또는 자제 (실험 준비 참조).

3. 1.2 테스트할 박테리아의 약물 민감성

3. 1.3 기기 접종 고리, 알코올 램프, 천공기, 옥스퍼드컵, 이동관, 발사기.

3.2 실험 준비 야오 민 정제 준비: 구매 또는 자체 제작.

준비 방법: 신화 1 정성여과지를 가져와 펀치로 지름이 6 mm 인 동그란 종이 조각을 만든다. 동그란 종이 50 장을 깨끗하고 건조한 빈 페니실린 병에 넣고 단일 크라프트지로 병 입구를 감쌌다. 15 파운드의 압력 하에서 고압 멸균 후. 1520 분, 37 C 배양함 또는 오븐에 며칠 동안 넣어 완전히 건조시킵니다.

항균 용지 준비: 50 장의 종이가 든 페니실린 병에 0.25ml 약액을 넣고 종이를 뒤집어 각 종이가 약액에 완전히 스며들도록 한다. 종이를 뒤집을 때, 종이는 으깨져서는 안 된다. 병구에 약품명을 적어 37 C 배양함에 넣어 밤을 보내고 말린 뒤 뚜껑을 덮는다. 가능하다면 진공 건조할 수 있습니다. 습기를 받지 말고 어둡고 건조한 곳에 보관하세요. 유효기간은 36 개월입니다.

약액의 조제 (상품약 실험): 상품약 치료량 비율에 따라 약액을 배합한다. 예를 들어, 시판약품이 바이빙 사라지면 0.0 1% 의 식수를 정해진 양만큼 처리하여 이 비율에 따라 약액을 배합할 수 있다. 10 밀리그램을 10 밀리리터의 물에 넣어 골고루 섞을 수 있습니다. 이런 희석액은 약민 실험에 쓰이는 약액이다.

3.3 실험조작방법 3.3. 1 약민편법은' 초정대' 에서 알코올등 화염멸균된 접종고리로 적당량의 세균 배양물을 골라내고, 줄을 긋는 방법으로 세균을 배양기 배양기에 바른다. 구체적인 방법 무균접종 고리로 적당량의 세균을 각각 페트리 접시 가장자리의 네 점에 바르고, 각 지점에서 페트리 접시의 1/2 까지 세균을 표시한다. 그런 다음 두 번째 대시선을 찾아 판의 1/2 로 가서 세균이 판에 고르게 분포될 때까지 차례대로 선을 그었다. (또한 시험균을 선택해 소량의 생리염수에서 균현액을 만들고 무균면봉으로 시험균 현액을 평판 배양기 표면에 바르도록 선택할 수 있다. 균일 및 조밀 한 코팅 필요)

주정등 화염멸균 후 족집게를 멈추고 약민편을 평판 배양기 표면에 붙인다. 약민편을 배양기에 단단히 붙이려면 족집게로 약민편을 살살 눌러도 된다. 결과를 정확하게 관찰하기 위해 약민 정제가 평판 배양기에 규칙적으로 분포되도록 요구한다. 일반적으로 요리 중앙에 한 조각을 붙이고, 외곽 등거리에 몇 조각을 붙일 수 있다 (외곽에는 7 조각을 붙일 수 있다). 각 약민편의 이름을 기억하다.

페트리 배양기는 37 C 배양상자에서 24 시간을 배양하여 효과를 관찰한다.

3.3.2 옥스포드컵은' 초정대' 에서 화염 (주정등) 멸균된 접종 고리로 적당량의 세균 배양물을 골라내고, 스크라이브 방법으로 세균을 평판 배양기에 발랐다. 구체적인 방법 무균접종 고리로 적당량의 세균을 각각 페트리 접시 가장자리의 네 점에 바르고, 각 지점에서 페트리 접시의 1/2 까지 세균을 표시한다. 그런 다음 두 번째 대시선을 찾아 판의 1/2 로 가서 세균이 판에 고르게 분포될 때까지 차례대로 선을 그었다. (또한 시험균을 선택해 소량의 생리염수에서 균현액을 만들고 무균면봉으로 시험균 현액을 평판 배양기 표면에 바르도록 선택할 수 있다. 코팅이 균일하고 촘촘해야 한다. ) 을 참조하십시오

멸균된 스테인리스강 튜브 (내경 6nm, 외경 8nm, 고 10nm 의 원형 튜브 각 플레이트는 46 개의 작은 튜브를 수용할 수 있습니다. 분을 등분한 후 각 시험관에 일정량의 각종 약액을 떨어뜨려 유출을 방지하다. 37 C 에서 8 18 시간을 배양하여 결과를 관찰하다.

페트리 배양기는 37 C 배양상자에서 24 시간을 배양하여 효과를 관찰한다.

3.3.3 천공법은 간단하고, 비용이 저렴하며, 조작하기 쉬우며, 상품약품의 검사에 적용된다.

초순대' 에서는 화염 (주정등) 멸균 접종 고리로 적당량의 세균 배양물을 골라 줄을 그어 세균을 페트리 배양기에 바른다. 구체적인 방법 무균접종 고리로 적당량의 세균을 각각 페트리 접시 가장자리의 네 점에 바르고, 각 지점에서 페트리 접시의 1/2 까지 세균을 표시한다. 그런 다음 두 번째 대시선을 찾아 판의 1/2 로 가서 세균이 판에 고르게 분포될 때까지 차례대로 선을 그었다. (또한 시험균을 선택해 소량의 생리염수에서 균현액을 만들고 무균면봉으로 시험균 현액을 평판 배양기 표면에 바르도록 선택할 수 있다. 코팅이 균일하고 촘촘해야 한다. ) 을 참조하십시오

멸균 후 스테인리스강관 (외경 4 mm, 구멍 지름, 구멍 거리 3 mm, 파이프 양끝은 매끈하고 유리관, 자관도 가능) 을 배양기에 놓고 바늘로 구멍 내 배양기를 골라내고 화염으로 바닥을 덮어서 배양기와 플레이트를 충분히 융합시킵니다 (약액 유출을 방지하여 결과에 영향을 미침).

견본 추가: 샘플이 가득 찰 때까지 다른 약액에 따라 샘플을 넣는다.

페트리 배양기는 37 C 배양상자에서 24 시간을 배양하여 효과를 관찰한다.

3.4 결과 세균이 칠해진 진지판에 항균제가 한천 주위에 확산되면서 농도가 점차 낮아져 종이 조각 주변의 일정 거리 내에서 세균의 성장이 억제됐다. 밤새 배양한 후 억제균권을 형성하다. 억제균권이 클수록 이 약물에 대한 균주의 민감성이 커진다. 그렇지 않으면 작아진다. 억제균권이 없다면, 균주가 이 약물에 내성이 있다는 것을 설명한다. 그 직경은 약물 농도와 밑줄 친 세균 농도와 직접 관련이 있다.

3.5 표준 약민 실험 결과를 판단하려면 정균권 지름을 감도를 판단하는 기준으로 삼아야 한다.

표 1 약물 감수성 검사 기준

억제 영역 지름의 민감도 (mm)

20 이상 극도로 예민하다

15~20 고감도

10~ 14 종민

10 보다 낮은 저감도

0 민감하지 않음

약물 감수성 검사 표준 참조 표

1, 폴리 점착제 억제 밴드; 9 mm 이상은 고감도이고, 6-9 mm 은 저감도이며, 억제균권은 민감하지 않다.

3.6 약민에 영향을 미치는 요인 3.6. 1 배양기는 실험균의 영양 요구에 따라 배합해야 한다. 판자재를 부을 때 두께가 적당해야지 (56mm 정도) 너무 얇으면 안 된다. 일반적으로 1820ml 배양기를 직경 90mm 의 페트리 접시에 붓는 것이 좋다. 배양기에는 칼슘, 마그네슘 이온과 같은 항균제 사용을 피해야 하며, 아미노글리코시드류의 항균활성을 낮출 수 있고, 가슴과 p-아미노 벤조산 (PABA) 은 술파민류와 TMP 의 활성을 길항할 수 있다.

3.6.2 세균의 접종량은 일정해야 하고, 과다하면 균권이 작아지고 효소를 생산할 수 있는 균주는 약물의 항균 활성을 파괴한다.

3.6.3 약물 농도 약물의 농도와 총량은 세균 실험 결과에 직접적인 영향을 미치므로 정확한 조제가 필요하다. 상업약품은 반드시 자신이 추천하는 치료량에 따라 엄격하게 배합해야 한다.

3.6.4 일반 배양 시간은 37 C 865438 08 시간이다. 일부 항균제는 폴리점균으로 천천히 전파된다. 항균제가 들어 있는 평판 배양기를 4 C 냉장고에 2~4 시간 동안 넣어 항균제를 사전 확산시킨 다음 37 C 배양함에 넣어 배양할 수 있어 세균의 성장을 늦추고 더 큰 억제균권을 얻을 수 있다.

약물 감수성 검사의 응용