세포 복구 단계

진핵 세포는 일반적으로 혈청과 극저온제와 함께 배양 배지에 현탁되어 -196°C의 액체 질소에 보관됩니다. 상업적으로 주문한 경우 일반적으로 드라이아이스에 싸인 냉동병에 보관됩니다. 따라서, 냉동된 세포를 신속하게 해동하고 즉시 배양해야 최대 생존율을 얻을 수 있습니다. 냉동보존 중 첨가물을 제거하려면 24시간 후에 배양액을 교체해야 합니다.

1. 재료

배지, 37'C로 예열

배양 플라스크

70% 에탄올을 채운 비이커

1ml, 10ml 피펫, 피펫 및 피펫팅 헤드

2. 단계

냉동된 세포 튜브를 37'C 수조에서 해동하고 빠르게 흔들어 녹입니다. 1분 이내에 튜브의 세포.

녹인 튜브를 70% 에탄올이 담긴 비이커에 담그고, 전체 실험은 클린벤치에서 진행됩니다.

크라이오튜브를 조심스럽게 열고 에탄올이 튜브에 스며들지 않도록 하세요.

냉동 바이알에 들어 있는 세포를 배양 플라스크에 옮기고 예열된 배양 배지를 즉시 첨가합니다.

배양병 뚜껑을 닫고 24시간 동안 배양하세요.

기존 배양 배지를 새 배양 배지로 교체합니다.

2~3일 동안 계속 배양하거나 지침의 권장 사항을 따르세요.

3. 따뜻한 팁

1. 해동된 세포는 즉시 배양해야 하며, 배양이 너무 늦어지면 액체질소에 보관해야 합니다.

2. 세포는 일반적으로 1ml의 용량으로 동결되며, 새로운 배양액을 첨가하여 10ml로 증가시킵니다.

3. 냉동보관된 세포를 해동한 후 세포를 원심분리하고 새로운 배양배지에 세포를 다시 부유시킵니다. 이 방법은 냉동보존제에 민감한 세포에만 적합하며, 다음날 배지는 사용할 수 없습니다. 예상치 못한 일로 인해 새로운 매체로 교체되었습니다.