[공중 보건 미생물 샘플링. 검출 방법 개요] 물에서의 미생물 검출 방법

(영양 한천, 12 1℃ 고압 멸균 20min, 37 C 배양 48h)

1. 두 가지 방법

(1) 충격법 (2 급 또는 6 급 미생물 샘플러)

(2) 자연 침강 법 (노출 5min)

샘플링: 매화 분포, 높이:1.2 ~1.5m; 벽에서:1m.

둘째, 차 미생물 검사 방법

(1) 총 박테리아 수

1. 생리염수 준비: 염화나트륨 (8.5g) 을 증류수 (1000mL) 에 녹여 시험관에 나누어 10mL

2. 샘플링: 생리염수로 면봉을 촉촉하게 적시고 다기 안팎에 각각 50cm2, 즉 입과 입술 접촉점 한 바퀴 (1~ 1.5cm) 를 바르고 무균 가위로 면봉손 접촉점을 자르고 4 시간 이내에 면봉을 넣는다

3, 검사 절차:

샘플 검사 → 두 개의 무균판 (오염이 심하면 희석 10 배) 을 1mL 당 → 37 C 배양 48 시간 → 식민지 수 → 보고.

4. 단위: cfu/cm2.

(2) 대장균

1. 배양기: 유당 담염 발효액 (2 부, 튜브 당 10mL,115 C 고압 멸균/KLOC

2, 시험 방법: 발효법 (구체적인 내용 교재 1 1 페이지)

샘플 검사 (나머지 샘플은 총 박테리아 수를 결정하는 데 사용됨)

4. 그람 염색 과정: (양성세균은 보라색, 음성세균은 붉은색)

(1) 초기 염색: 1min, 워싱;

(2) 요오드 염색: 65438 0 분, 워싱;

(3) 탈색: 30s, 워싱;

(4) 복염: 65438 0 분, 세탁, 건조, 거울 검사.

5. 결과 보고: 유당 발효관이 결국 산가스를 생산하고 그란씨의 염색이 무포자균 음성일 때 대장균군의 검출을 보고할 수 있다.

셋째, 수건, 침구 미생물 검출 방법

(1) 총 박테리아 수

1. 샘플링

(1) 수건, 베갯수건: 각 중심 25cm2 를 반으로 접은 후

(2) 시트, 시트: 위, 아래, 두 부분 가운데 25cm2 를 앞뒤로 바른다

2. 검사절차는 다기 세균 총수와 같습니다.

3. 계산 단위: cfu/25cm2.

(2) 대장균 군 (차 세트와 같은 검사 절차)

1. 스미어: (총 박테리아 수를 측정할 때 수집한 샘플 사용)

넷째, 미용 기기 미생물 검사 방법

(a) 대장균

1, 샘플링

푸시 (push): 푸시 (push) 의 앞부분에 세 번 고르게 바르십시오.

이발 칼, 가위, 발 손질 도구: 사용한 칼, 가위 양면에 각각 샘플을 바릅니다. 칼 두 자루나 가위 두 자루를 하나의 견본으로 자르다.

2.5mL 샘플을 쌍유당 담염 발효관에 붓고 37 C 에서 24h； 를 배양한다.

3. 분리 배양: 이홍미블루판 접종, 그란씨 염색경 검사;

4. 검사 확인: 37 C 에서 유당 발효관 24h 를 접종하여 가스 생산 상황을 관찰한다.

5. 결과 보고: 그람 염색이 음성인 무포자균 세균은 양성대장균으로 보고될 수 있다.

(2) 황금색 포도상구균

1. 배양기: 염화나트륨 육수 7.5% 또는 췌백톤 콩육수 배양기.

2. 단계:

(1) 나머지 대장균 5mL 을 배양기에 붓고 37 C 에서 24h； 를 배양한다.

(2) 접종혈판, 37 C 배양 24 시간 관찰 형태: 원형, 황금색, 볼록, 표면이 매끄럽고 주변에 용혈권이 있습니다.

(3) 식민지 현미경 검사 선택: 그람 양성 (빨강), 포도상 배열;

(4) 만니톨 발효 실험: 만니톨 발효 배양기에 접종하고, 37 C 에서 24h 를 배양하여 산이 생산되는지 관찰한다.

(5) 혈장 응고 효소 시험

슬라이드 방법: 깨끗한 슬라이드 양쪽에 생리염수 한 방울, 다른 쪽 끝에는 혈장 한 방울, 링균이 접종되어 각각 섞는다. 5min 후 응고되지 않은 사람은 음성이었다. 혈장에는 알갱이가 있고 생리염수에는 없는 경우 양성이다.

동사 (verb 의 약어) 슬리퍼 미생물 검사 방법

곰팡이와 효모

(유리구슬은 생리염수에 넣어야 한다)

1. 배양기: 곰팡이 배양기, (호홍) 방글라데시 레드 배양기, 감자 포도당 한천 배양기 (PDA).

2. 샘플링: 면봉으로 각 슬리퍼갑이 발가락과 접촉하는 5cm×5cm 영역에 골고루 바르고, 3 회, 슬리퍼 한 켤레가 샘플입니다.

3. 면봉으로 손바닥에 시험관 100 번을 흔들어 곰팡이 포자를 분리합니다.

4. 배양: 25 ~ 28 C 의 곰팡이 배양함에서 일주일 동안 관찰을 배양한다.

5. 단위는 cfu/50cm2 입니다.

여섯째, 욕조, 표면 (발) 분지 미생물 검출

(1) 총 박테리아 수

무균 생리염수: 욕조 샘플링 125mL/ 병 면 (발) 분지 샘플링에 50 밀리리터를 사용합니다. 샘플링 위치: 분지 내 1/2 에서 1/3 높이;

분포: 욕조 매화 분포; 면 (발) 분지는 반대쪽 두 측벽에 분포한다.

방법: 스미어 방법 (차 세트 방법과 일치)

단위: cfu/25cm2.

(2) 대장균 군 (차 세트와 동일)

일곱째, 수영장 물 미생물 검출

(1) 총 박테리아 수

1. 샘플 병: 산 없음, 알칼리 없음, 무독성 유리 용기.

2. 멸균 전에 충분한 10% 황산나트륨 용액을 넣고 보통 125mL 물 견본에 0. 1mL 을 넣는다.

3 단계: 샘플링

절차 (차 세트의 총 박테리아 수와 동일)

(2) 대장균

1. 배양기: 3 배 농축 유당 단백질 배양액 (증류수는 변하지 않고 다른 성분은 3 배).

2 단계

(1) 추측 테스트

100mL 물 샘플을 50mL 3 배 농축 유당 단백질 배양액이 들어 있는 두 개의 큰 시험관 (작은 시험관 포함) 에 넣는다. 10 ml 물 샘플을 5mL 3 배 농축 유당 단백질 배양액이 들어 있는 10 시험관 (작은 시험관 포함) 에 넣는다. 흔들어서 고르게 배양하다.

(2) 판 분리

에오신 메틸렌 블루 접종, 배양 관찰; 전형적인 식민지 형태: 짙은 보라색이나 붉은 보라색, 금속 광택이 있습니다.

(3) 재 발효 실험

그란씨의 염색, 유당 발효관 접종, 배양, 관찰.

(4) 체크리스트: 1000mL 물 시료에서 대장균 군의 MPN 값.

여덟, 식수 미생물 검사 방법

(1) 샘플링

1. 샘플 컨테이너는 깨끗하고 무색이며 독이 없는 폴리에틸렌 플라스틱과 경질 유리 (붕규산 유리라고도 함) 로 만들어야 합니다. 샘플병은 반드시 전병 전용이어야 하며, 실험실에 진한 용액이 들어 있는 병은 샘플병으로 사용해서는 안 된다. 보통 우리는 500ml 고압 멸균으로 가는 목병을 샘플링한다.

용기, 코르크 및 병뚜껑은 멸균 온도를 견딜 수 있어야합니다.

검사에 사용된 모든 물품은 반드시 완전히 멸균해야 한다. 멸균 전에 철저히 씻어야 한다. 12 1℃ 고압 멸균 20min 또는160 C 건조 2h.

냉장 보관, 4 시간 이내에 테스트. 유리잔염소가 있다면 샘플병을 소독하기 전에 65438±025ml 마다 0.65438±0ml 황산나트륨 용액을 넣는다.

(2) 세균의 총수

(c) 총 대장균 군

1. 유당 발효 시험

(1) 10mL 물 샘플을 10mL 이중 유당 발효관에 추가합니다. 1 밀리리터의 물을10ml 단일 유당 발효관에 넣는다. 0. 1 밀리리터의 물을10ml 단일 유당 발효관에 넣는다. 희석도당 시험관 5 개를 접종하다.

(2) 37 C 에서 24 시간 동안 배양하여 산산가스 생산 현상을 관찰하다.

분리 및 배양 (eosin 메틸렌 블루 접종, 배양)

실험 확인 (그람 염색, 거울 검사, 유당 접종 발효관)

4. 결과 등록: 룩업 테이블.

(4) 내열성 대장균

1. 배지: EC 배지

절차: 대장균 다관 발효.

배양 온도: 44.5℃, 24 시간.

(5) 대장균

1. 배양기: EC-MUG 배양기 (배양기 가열 용해 후 366nm 자광 아래 형광이 있는지 확인해야 함).

배양 온도: 44.5℃, 24 시간.

3. 관찰: 어둠 속에서 366nm 자외선으로 비추는 파란색 형광이 있는지,

4. 양성시험관 수를 계산하고, 표를 조사하여 가장 가능한 수량을 얻는다. 결과는 MPN/ 100 밀리리터로 보고되었습니다.

Ix. 공공 * * 장소 중앙 에어컨 시스템

(1) 응축수와 냉각수의 폐군단균

(1) 샘플링

1. 샘플 컨테이너: 유리병, 폴리에틸렌병, 광구병, 사용 전 소독을 선택할 수 있습니다.

2. 샘플량: 무균 조작에 따라 각 샘플점에서 약 500ml 의 물 샘플 (또는 퇴적물, 슬러지 등 샘플) 을 채취합니다.

3. 중화: 염소나 오존으로 소독한 샘플의 경우 멸균하기 전에 샘플 용기에 황산나트륨 용액을 넣어 중화한다.

4. 샘플 운송 및 보존: 샘플은 2 일 이내에 실험실로 배달하는 것이 가장 좋습니다. 냉동하지 말고, 빛을 피하고 열을 피하고 실온을 15 일 이내로 보관해야 합니다.

(2) 열처리: 1 밀리리터로 샘플을 씻고 50 C 수조에서 30 분 동안 가열합니다.

산 처리: 5ml 용출 샘플을 가져 와서 pH 를 2.2 로 조정하고 부드럽게 흔들어 5min 을 놓습니다.

(3) 접종판은 35 ~ 37 C 농도가 2.5% 인 CO2 배양함에 넣는다. 배양물을 관찰할 때 태블릿을 뒤집어 65438±00d 를 부화시키고 촉촉함을 유지한다.

(4) 관찰

군단균은 성장이 느리고 다른 세균으로 덮이기 쉬우므로 매일 입체현미경으로 관찰해야 한다. 군단균 식민지에는 보통 흰색, 회색, 파란색, 보라색 등 다양한 색이 있으며 짙은 갈색, 회색 녹색, 진홍색이 있습니다. 균락이 가지런하고 표면이 매끈하여 전형적인 모유리이다. 자외선등 아래에는 형광등이 있습니다.

(2) 공기 공급의 총 박테리아 수

무균 작업에서 6 급 스크린 공기충격 샘플러, 공기유속은 28.3L/min, 샘플링점 수집 시간은 5~ 15min 입니다. 세균을 수집한 후 영양진지판에서 35 ~ 37 C 에서 48 h 를 배양하여 균군수를 세었다.

(3) 공기 공급의 총 곰팡이 수

샘플링 방법은 위와 같습니다. 채집한 곰팡이는 샤크 진지배양기에서 28 C 에서 5 ~ 7 일 동안 배양하고 매일 관찰하고 7 일째에 결과를 기록한다. 곰팡이 수가 너무 많으면 5 일째 결과를 집계해 배양 시간을 기록하고 cfu/m3 로 변환할 수 있다.

(4) 가스 공급원의 β-용혈성 연쇄상 구균

혈액 한천 플레이트에 표면 회색, 볼록, 직경 0.5mm~0.7mm 의 작은 균락을 형성하여 투명하거나 반투명하며 표면이 매끄럽고 유백색이며 균락 주위에 용혈고리가 있다. 현미경 하에서, 그것은 그람 양성 무포자균, 원형 또는 타원형으로 체인형으로 배열되어 있다.

(5) 덕트 내부 표면의 미생물 검사

단면 검토 영역: 각 점의 단면 검토 영역은 50cm2 여야 합니다.

샘플링 방법: 스크래핑 및 와이프 방법.

박테리아와 곰팡이의 배양과 계산 방법은 같다.