마우스 심근 경색의 전통적인 수술 방법

1. 카테콜아민에 의한 심근 괴사 모델

카테페놀아민은 관상동맥을 수축시켜 심근 수축력을 높이고 심근 산소 소모량을 증가시켜 심근 괴사를 유발한다.

상용쥐 체중 100~200g, 남녀 제한 없음.

침전극이 있는 심전도기나 파동기 또는 생리기록기.

카테페놀아민: 에피네프린 수용액을 자주 사용하며, 아드레날린 제거에도 사용할 수 있습니다.

심전도를 제때에 기록해야 할 때 에테르로 다람쥐를 경미하게 마취시키고, 앙와위를 들어 머리와 사지를 고정시키고, 가슴 유도와 ⅱ 유도로 심전도를 기록할 수 있다. 약을 먼저 주사한 다음 심전도 변화를 정기적으로 관찰할 수도 있다.

다람쥐는 허벅지 안쪽 피하 (또는 복강) 에 이병아드레날린 수용액을 주사해 매일 1 회, 복용량은 1~ 10mg/kg 몸무게로 2 일 연속 투여한다. 심전도는 1, 5, 10, 30, 45. 매번 주사 후 min 이 급성 심근결혈의 변화를 관찰할 수 있다.

일반적으로 첫 주사 후 3 ~ 4 일 동안 경계가 뚜렷한 심근괴사 부뚜막을 형성하고, 7 일째 부뚜막 내 섬유세포가 크게 늘었고, 3 ~ 4 주 후 심근섬유화 단계에 들어간다.

마지막 주사 후 48 시간 동안 심장 병리 검사를 실시한 결과, 대부분의 동물들은 경계가 뚜렷한 심근괴사 아궁이를 볼 수 있었다. 괴사 후, 이 병변들 중 일부는 깨끗하고 비어 있어서 세포가 거의 없다. 더 많은 것은 다세포 병변으로, 강한 대식세포 반응과 왕성한 성섬유세포 증식을 가지고 있다. 악사아궁이는 주로 좌심실 벽과 실 간격, 특히 심끝 부근에 분포되어 있다. 보통 큰 병변은 유두근과 내층 심근에 많이 분포되어 있지만, 중층과 외층심근의 병변은 일반적으로 작다. 심벽 내층의 병변에서 심내막하가 자주 체류하는 1~2 악사된 심근세포를 볼 수 있지만, 이런 체류는 전형적인 심근경색처럼 완전하지 않으며, 일부 괴사는 심내막에 이를 수 있다. 심근 괴사는 종종 관상 동맥의 작은 가지 주위에 분포한다.

심근 괴사 또는 섬유화 범위는 영상 분석 시스템을 통해 측정 할 수 있으며 심근 섬유화 또한 콜라겐 함량을 통해 검출 될 수 있습니다.

카테콜아민은 심근 괴사 모델을 간단하고 안정적으로 유도한다. 카테페놀아민은 관상동맥 수축, 심근수축력 향상 등 다양한 기능을 갖추고 있으며, 심근괴사의 병리 특징과 메커니즘에서 인간의 결혈성 저산소성 심근사망과 어느 정도 유사성이 있다. 이 모델은 심근 괴사 및 심근 섬유화 메커니즘의 실험 연구 및 약물 스크리닝에 사용될 수 있습니다.

뇌하수체 후엽소에 의한 심근 괴사 모델

뇌하수체 후엽소는 관상동맥을 강하게 수축시켜 심근결혈산소 결핍성 괴사를 일으킬 수 있다.

성년 큰쥐나 토끼, 이 절은 큰쥐를 예로 들어 성별을 가리지 않는다.

심전도 흔적의 처리는 이전과 같다.

다람쥐의 외측 근육 주사 가압소, 일일 1 회, 복용량은 10~20 U/kg 체중, 2 일 연속.

1, 5, 10, 30 ... 매번 주사 후 30 분, 침전극 심전도기로 심전도를 기록하고 급성 심근결혈의 변화를 관찰한다.

뇌하수체 후엽소 주사 후 심근괴사와 섬유화 타이밍은 이병아드레날린으로 인한 쥐의 심근괴사와 섬유화 타이밍과 유사하며 마지막 주사 후 2 일, 1 주, 3 주째 주에 심장을 채취해 병리 관찰을 할 수 있다.

마지막 주사 후 48 시간, 심장을 채취해 병리 검사를 한다. 대부분의 다람쥐의 심근에는 다발성 부뚜막성 심근이 괴사하고, 악사부뚜막 내 심근세포가 사라지고, 대량의 대식세포와 섬유세포가 나타난다. 악사병변은 일반적으로 작으며 좌심실 벽의 안쪽, 중간, 심실 간격이 가장 많다. 소수의 동물은 심실 벽에 전형적인 대면적 리본 경색을 형성할 수 있다. 경색 부위의 심근 응고성 괴사는 출혈을 동반하며, 심내막에는 박층괴사 심근세포가 남아 있을 수 있다.

이 모델은 결혈산소 부족으로 인한 심근 손상의 메커니즘 및 예방에 대한 실험 연구에 사용될 수 있다. 병리 모델에서 볼 때, 뇌하수체 후엽소가 심근괴사를 일으키는 범위와 수는 동물마다 크게 다르며, 이병아드레날린으로 인한 심근괴사보다 안정적이지 않다.

관상 동맥 결찰에 의한 심근 경색 모델

예전에는 개와 돼지를 실험 대상으로 많이 사용했지만 가격이 비싸서 사육이 불편해서 최근 몇 년 동안 작은 동물로 방향을 바꾸었다. Selye 단순화, Bajusz 에 의해 개선된 다람쥐 심근경색 제작 방법이 성숙해 국내외에서 널리 사용되고 있다. 여기 쥐를 예로 들어 소개하겠습니다.

동물의 왼쪽 관상 동맥을 결찰하기 전에 하강하여 혈액 공급 부위의 심근경색을 초래하다. 경색이 빠르게 발생하고 결혈구는 일반적으로 고정되어 있어 역학, 심전도 모니터링, 조직학 검사, 혈청효소 등의 지표를 이용하여 경색 범위와 손상 정도를 종합적으로 평가할 수 있다.

일반적으로 몸무게가 200~300g 인 다람쥐를 선택하는데, 성별은 제한이 없다.

쥐 전용 기관 삽관 및 마이크로 인공 호흡기

에테르로 쥐를 마취시키고, 앙와위를 고정시키고, 가슴을 자르고, 요오드로 소독한다.

조건부일 때 기관지 삽입관을 사용하고, 마이크로인공호흡기를 연결하고, 심전도를 체표에 배치하여 감시한다. 이런 수술은 기관지를 꽂지 않아도 되지만 수술 안전성은 떨어진다.

흉골의 왼쪽에서 흉골과 평행하게 세로 절개를 하고 피부와 흉대근을 잘라 갈비뼈를 드러낸다. 흉골에서 약 0.5cm 떨어진 곳에서 5, 6 갈비 연골을 잘라서 흉곽과 심낭을 열어 심장을 노출시킵니다. 가슴을 살살 눌러 심장을 흉곽에서 밀어내다. Bajusz 가 소개하는 방법은 여섯 번째 갈비 연골만 자르거나 갈비 연골을 자르지 않고 족집게로 다섯 번째, 여섯 번째 갈비 연골의 틈새를 넓히거나 심장을 짜내는 것이다.

다람쥐의 관상 동맥 자율동맥 분기 후 육안으로는 식별하기 어려우므로 해부 표지를 이용하여 그 위치를 결정해야 한다. 왼쪽 관상 동맥을 결찰해야 하는 경우 심장이 돌출된 후 왼손 엄지와 검지로 쥐 심장을 잡고, 심장끝이 머리 오른쪽을 약간 가리키고 있다. 작은 구부러진 바늘로 000000 실을 꿰고 폐동맥송곳 왼쪽 가장자리에서 들어와 진입점과 왼쪽 심귀 뿌리 사이의 가상선 중간을 지나 실이 통과하는 심근과 함께 결찰한다. 결찰 부위는 왼쪽 관상 동맥 개방 아래 약 65438±0mm 에 있다. 오른쪽 관상 동맥을 결찰해야 하는 경우 전용 견인기로 오른쪽 귀를 열고 폐동맥 원추의 오른쪽 가장자리, 대동맥벽 근처에 묶는다. 결찰 후 심장을 흉곽으로 되돌려 놓다.

심전도로 모니터링해 결찰이 성공했다고 판단한 후 흉곽을 자를 때 보존한 봉합선으로 흉벽을 닫는다. 피부를 꿰매다. 기관지 삽입관과 심전도 전극을 제거하다.

결찰 시 심전도에 급성 결혈성 변화가 나타난다. 예를 들면 II 도R 파 끝이 높고, ST 세그먼트가 높아지고, Q 파가 나타나 깊어지는 등. 24 시간 결찰한 후, 광경 아래서 심근경색의 변화를 판단할 수 있다. 결찰 후 4-7 일 동안 활발한 근성섬유세포와 성섬유세포가 경색 부뚜막 주변에서 증식했다. 2 ~ 3 주, 수리 섬유화 단계에 진입; 넷째 주에는 육안으로 볼 수 있는 흉터가 생길 수 있다.

결찰 후 짧은 시간 내에 광경 아래 심근경색 손상이 완전히 형성되기 전에 심장 샘플의 조직화학 염색은 심근결혈로 인한 탈수효소 활성의 상실을 표시하는 데 사용될 수 있다. 예를 들어, 심근 조직을 새로 준비한 염산 질기 사질소 블루 용액에 넣으면 정상 심근은 파란색이고 경색 심근은 음영처리되지 않는다. (데이비드 아셀, Northern Exposure (미국 TV 드라마), 건강명언) 경색 면적을 계산하는 데 사용할 수 있습니다.

결찰 후 3 ~ 4d ~ 4d, 광경 아래서 심근경색의 전형적 변화를 볼 수 있다. 1 경색 중심에서는 심근세포와 심근간질이 응고성 괴사, 악사된 근세포의 산성화, 핵파열이 사라진다. 부분적으로 간질 출혈 또는 호중구 침윤을 볼 수 있습니다. ② 경색 난로 주변에서 수축대 괴사와 심근세포의 응고성 용해를 볼 수 있다. ③ 경색 부뚜막 주변에는 일부 심근세포가 액화성 근육 용해까지 나타난다. ④ 경색 부위의 심내막하층과 정맥동 주변에는 종종 얇은 심근세포가 남아 있는데, 이 심근세포는 괴사되지 않았거나 액화성 근용해만 남아 있다.

관상동맥을 묶는 심근경색 모델은 관상 심장질환인 심근경색의 발생 메커니즘과 예방에 대한 실험연구에 효과적이다. 쥐 이런 수술 의 사망률 는 수술 의 숙련도 와 인공 호흡 장치 의 사용 과 관련 있다. 일반 수술 후 생존율은 60% 이상에 달할 수 있다. 수술 후 24 시간, 수컷 사망률 약 38%, 암컷 사망률 20% 라는 자료가 있다.